茶籽饼降解菌的筛选与发酵条件优化

茶籽饼降解菌的筛选与发酵条件优化(13700字)
摘  要：以蛋白酶活力和生物量为指标从浏阳河畔附近土壤中筛选出能降解茶籽饼的产蛋白酶菌株T7,该菌株经紫外诱变得到蛋白酶活更高的的菌落T7-50S。经形态学分析T7-50S菌为革兰氏阳性菌；经培养基成分优化、培养条件优化及正交实验，T7-50S的最适培养基成分及培养条件为：茶籽饼5%，乳糖3%，温度38℃，转速250 rpm，初始pH 7，培养时间48 h。在此条件下蛋白酶活力可达到1111.27 U/ml，生物量约为1.13×109 cfu/ml。

关键词：茶籽饼；蛋白酶；筛选；诱变；发酵条件优化

Screening A Strain Degrading Tea Seed Cake And Optimization of Fermentation Conditions
Abstract: Tea seed cake degrading strain T7 was screened from soil near Liu Yang River according to detection index of protease and biomass. Morphological studies showed T7 was Gram-positive bacterium.T7-50S, a strain with higher activity of protease, was mutated from T7 by UV mutagenesis. Optimization of media and fermentation condition and orthogonal experiment were furthering studied. Results showed the protease activity and biomass reached 1111.27 U/ml and 1.13×109cfu/mL respectively, When T7-50S was cultured conditions as tea seed cake 5%, laceose 3%, 38℃, rotation speed 250 rpm, pH 7 for 48 h.   
Key words: tea seed cakes; protease; screening; mutagenesis; fermentation condition optimizing

目  录
摘  要    1
关键词    1
1 前言    2
1.1 茶籽饼的主要应用    2
1.1.1 茶籽饼提油    2
1.1.2 提取茶皂素    2
1.1.3 用作肥料    6
1.1.4 茶饼作饲料    6
1.2 发展存在的主要问题    6
1.3 研究背景及立题意义    7
2 材料与方法    7
2.1 材料    7
2.1.1 菌种及茶籽饼来源    7
2.1.2 主要仪器    7
2.1.3 主要药品    7
2.1.4 主要试剂    8
2.1.5 培养基    8
2.1.6 菌种活化及种子液制备    9
2.1.7 摇瓶发酵培养    9
2.2 试验方法    9
2.2.1 初筛    9
2.2.2 复筛    9
2.2.3福林酚法测定蛋白酶活力    9
2.2.4紫外诱变    11
2.2.5 T7菌发酵条件优化    11
3 结果    12
3.1菌株的筛选    12
3.2 菌种镜检    12
3.3 紫外诱变    12
3.4发酵培养基成分优化结果    13
3.4.1 碳源    13
3.4.2 基质浓度    14
3.4.3 无机盐    14
3.5培养条件优化结果    14
3.5.1 培养温度    14
3.5.2转速    15
3.5.3 pH值    15
3.5.4 培养时间    16
3.6 培养及成分正交试验    16
4 分析与讨论    17
4.1 碳源对酶活的影响    17
4.2 基质浓度对酶活的影响    17
4.3 无机盐对酶活的影响    18
4.4培养温度对酶活的影响    18
4.5 培养时间对酶活的影响    18
5 小结    18
参考文献    18
致    谢    21